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全自動原位雜交儀中競爭ELISA檢測親和力服務

2020-11-20 09:50:18

比如:在抗原抗體結合位點的篩選(抗體以及小分子多肽的篩選)實驗中,競爭ELISA法測定親和力可以快速、進行抗原抗體、抗原與小分子多肽、蛋白質與抗體等親和力測定以及高通量的親和力數(shù)據(jù)排序,為客戶節(jié)省了大量的實驗成本,包括:人力、時間、費用等,并且為客戶后續(xù)的實驗項目提供了全自動原位雜交儀數(shù)據(jù)支撐。

我們的熒光原位雜交儀科學家為客戶提供高性價比的快速、高通量的親和力測定以及親和力排序服務。為客戶提供1-2周的快速檢測周期,同時技術專家能夠為客戶提供專業(yè)、有效的售前技術咨詢,為客戶的實驗項目提供有力的保障。

佰泉致力于抗體抗原方面的研究,為客戶提供準確、快速的親和力測定服務??贵w及其片段是廣泛用于研究、診斷和治療的工具。 在表征抗體分子的不同參數(shù)中,對抗原-抗體的親和力測定的數(shù)據(jù)尤為重要。有幾種可用的方法來進行抗原抗體親和力檢測,但其中大多數(shù)要么依賴昂貴的設備(表面等離子體共振),要么不普遍適用(熒光修飾、透析)或需要修飾的抗原(放射性沉淀標記的抗原)。而競爭ELISA法測定親和力不是這種情況,它僅依賴于少量純化抗原和抗體,即可進行抗原抗體親和力檢測。


競爭ELISA法:


熒光雜交

 


1.為了溶液中抗原抗體親和力檢測的親和常數(shù)的真實性,必須嚴格要求實驗條件以避免親和值偏差低估十倍。首先,至好使用單價抗體片段(Fab 或 scFv),可以調(diào)整二價片段的數(shù)學計算,但前提是抗原每個分子包含單個結合位點。然而,隨著抗體工程的出現(xiàn),現(xiàn)在很容易在大腸桿菌中產(chǎn)生這樣的片段。其次,為了準確測量游離抗體濃度,ELISA不應顯著改變液相平衡。這需要進行初步實驗以確定正確的實驗條件。建議使用曲線擬合程序來避免方程線性化引入的偏差,例如Scatchard 變換。



2.當抗體片段 (A) 與溶液中的抗原混合時,我們可以寫成


[A]=[A]f+[A]b


[B]=[B]f+[B]b


3.這里A、[A]f、[A]b分別是總的、游離的和結合的A濃度,[B]f和[B]b分別是游離和結合的“結合位點” 濃度。如果抗原是單體,[B] 等于抗原濃度。但如果抗原是多聚體,


[B]=n[Ag]=nx


4.其中 n 是每個抗原的位點數(shù)(例如,同源二聚體為2),x 是抗原濃度。由于每個結合位點綁定一個(A),


Bb=Ab


5.因此質量定律為


Kd=[A]f*[B]f/[B]b



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