青海供應(yīng)FISH熒光批發(fā)
發(fā)布時間:2024-07-19 00:54:04青海供應(yīng)FISH熒光批發(fā)
蛋白同位素標(biāo)記是經(jīng)典的一種蛋白示蹤和蛋白組學(xué)定量技術(shù),與體外標(biāo)記技術(shù)相比,同位素標(biāo)記技術(shù)屬于體內(nèi)標(biāo)記。原理:用天然同位素(輕型)或穩(wěn)定同位素 (重型)標(biāo)記的必需氨基酸取代細(xì)胞培養(yǎng)基中相應(yīng)氨基酸,細(xì)胞經(jīng)5-6個倍增周期后,穩(wěn)定同位素標(biāo)記的氨基酸全部摻入到細(xì)胞新合成的蛋白質(zhì)中替代了原有氨基酸。不同標(biāo)記細(xì)胞的裂解蛋白按細(xì)胞數(shù)或蛋白量等比例混合,經(jīng)分離、純化后進(jìn)行質(zhì)譜鑒定,根據(jù)一級質(zhì)譜圖中兩個同位素型肽段的面積比較進(jìn)行相對定量。
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熒光原位雜交儀的探針有DNA探針和RNA探針,可對動物組織和植物組織中核酸進(jìn)行檢測,特異性較高。雜交所用的探針大致可以分為三類:(1)染色體特異重復(fù)序列探針;(2)全染色體或染色體區(qū)域特異性探針;(3)原位雜交儀特異性位置探針,由一個或幾個克隆序列組成。探針的熒光素標(biāo)記可以采用直接和間接標(biāo)記的方法。間接標(biāo)記是采用生物系標(biāo)記的dUTP經(jīng)過缺口平移法進(jìn)行標(biāo)記;而直接標(biāo)記法是將熒光素直接與探針核苷酸蔌磷酸戊糖骨架共價結(jié)合,或在缺口平移法標(biāo)記探針時將熒光素核苷三磷酸摻入。
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StatSpinTermoBrite原位雜交儀可根據(jù)實(shí)驗(yàn)者的設(shè)計(jì),在玻片上一步完成原位雜交(FISH)中變性和雜交兩個過程,而且能嚴(yán)格控制反應(yīng)溫度和環(huán)境濕度,在保證實(shí)驗(yàn)的成功率和重復(fù)率的基礎(chǔ)上極大地提高實(shí)驗(yàn)效率。ThermoBrite采用微電腦控溫,程序化變性/雜交步驟,使用方便。在獲得理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果同時,大大縮短了手工操作時間。變性/雜交在內(nèi)連續(xù)完成,縮短手工操作時間50%以上,減少有害溶液的用量,控溫精準(zhǔn),無須玻片裝滿,每次可以操作12個樣本,玻片放置/取出方便。
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動態(tài)濁度法是指通過檢測反應(yīng)混合物的濁度到達(dá)預(yù)先設(shè)定的吸光度所需要的反應(yīng)時間,或是檢測濁度增加速度來檢測內(nèi)毒素的方法。在適宜的條件下(溫度,pH值及無干擾物質(zhì)),細(xì)菌內(nèi)毒素激活C因子,引起一系列酶促反應(yīng),使鱟試劑產(chǎn)生凝集反應(yīng)形成凝膠。隨著凝膠的形成,反應(yīng)液的吸光度(OD值,濁度)增加,OD值增加的速度與內(nèi)毒素濃度成正相關(guān)。換言之,OD值上升某一預(yù)設(shè)限值(啟動OD)所需要的時間(定義為啟動時間)與內(nèi)毒素濃度成負(fù)相關(guān),啟動時間的對數(shù)與內(nèi)毒素濃度的對數(shù)成線性關(guān)系,據(jù)此,熒光原位雜交儀可以定量檢測供試品的內(nèi)毒素濃度。客戶也可以要求我們提供半定量方法-凝膠法進(jìn)行樣品內(nèi)毒素限度水平檢測。
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大腸桿菌(E.coli)重組蛋白表達(dá)技術(shù)經(jīng)過多年的發(fā)展,全自動原位雜交儀已經(jīng)變得日趨成熟。但想要在大腸桿菌表達(dá)體系獲得較高水平的可溶性以及高產(chǎn)量的蛋白表達(dá),尤其是針對大分子蛋白和某些藥物類蛋白,一個優(yōu)質(zhì)的表達(dá)策略必不可少??蛻糁恍枰峁┪覀円欢蔚鞍仔蛄?,CDS或蛋白名稱,我們富有經(jīng)驗(yàn)的科學(xué)家均可以為您在較短的時間內(nèi)制定一個完整的蛋白表達(dá)和純化方案。常見的小分子(分子量<10 kDa)蛋白類藥物,如Leptin,利拉魯肽,EGF等在原核表達(dá)過程中以親和標(biāo)簽+融合蛋白形式進(jìn)行表達(dá),發(fā)酵和純化。
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首先,成功率!原位雜交儀可以大大提高您實(shí)驗(yàn)的成功率。全程由機(jī)器程序控制的變性、復(fù)性過程避免了手工操作過程中的不確定性,同時也避免了甲酰胺、水浴鍋等因素造成的影響。一次FISH實(shí)驗(yàn)僅探針便價值逾千元,如果因?yàn)椴僮魇д`而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果作廢,損失相當(dāng)慘重。若干次實(shí)驗(yàn)失誤的損失便足以購買一臺雜交儀了。其次,效率!原位雜交儀可大大增進(jìn)您工作的效率,一臺ThermoBrite雜交儀可同時進(jìn)行12個樣本的雜交工作,試想,如果您要同時手工操作12個樣本的變性、梯度脫水,干燥、加探針、預(yù)熱雜交盒、雜交的過程,是一件多么繁瑣且耗時的工作!